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細(xì)胞培養(yǎng)全套解決方案

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細(xì)胞培養(yǎng)中的問題
問題可能原因解決方案推薦
培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁1.胰蛋白酶消化過度
2.支原體污染
3.培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解)
4.細(xì)胞老化
5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高??
1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度
2.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物
3.充入無菌CO2
4.啟用新的保種細(xì)胞
5.調(diào)節(jié)ZJ接種細(xì)胞濃度
培養(yǎng)基詳情點(diǎn)擊此處
懸浮細(xì)胞成簇1.培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子;
2.支原體污染;
3.蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解;4.DNA污染??
1.用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞,輕巧吹吸細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液;
2.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體;
3.用DNaseI處理細(xì)胞
培養(yǎng)基詳情點(diǎn)擊此處
培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢1.由于更換不同培養(yǎng)液或血清;
2.培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞;
3.培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;
4.試劑保存不當(dāng);
5.接種細(xì)胞起始濃度太低;
6.細(xì)胞已老化;
7.支原體污染?
1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;
2.換入新鮮配置培養(yǎng)液,或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長(zhǎng)因子;
3.用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物;
4.血清需保存在-10到-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內(nèi)用完 ;
5.增加接種細(xì)胞起始濃度;?
血清詳情點(diǎn)擊此處
培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好1.細(xì)胞本身的狀態(tài)
2.污染
3.培養(yǎng)基或血清
4.培養(yǎng)環(huán)境
1.注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;
2.避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清)
3.要用合適的血清或培養(yǎng)基,最好經(jīng)過驗(yàn)證
4.注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境
培養(yǎng)基詳情點(diǎn)擊此處
培養(yǎng)細(xì)胞死亡1培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;
2培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大;
3細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;
4培養(yǎng)液滲透壓不正確;
5培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積????
1.檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;
2.檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;
3.取新的保存細(xì)胞種;
4.檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓;
5.換入新鮮培養(yǎng)液?
培養(yǎng)基詳情點(diǎn)擊此處


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