孔雀石綠快速檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

本產(chǎn)品用于快速檢測(cè)水產(chǎn)（魚(yú)、蝦）組織中的孔雀石綠，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程需要1個(gè)小時(shí)左右，適用于各類企業(yè)及檢測(cè)機(jī)構(gòu)。本產(chǎn)品檢測(cè)限為3.0μg/kg。

1、檢測(cè)原理

孔雀石綠快速檢測(cè)卡應(yīng)用了競(jìng)爭(zhēng)YZ免疫層析的原理，樣本中的孔雀石綠在流動(dòng)的過(guò)程中與膠體金標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合，YZ了抗體和NC膜檢測(cè)線上孔雀石綠－BSA偶聯(lián)物的結(jié)合。如果樣本中孔雀石綠含量大于3.0μg/kg，檢測(cè)線T比質(zhì)控線C淺或者T線不顯色，結(jié)果為陽(yáng)性。反之，檢測(cè)線T顯色與質(zhì)控線C線相當(dāng)或者比C線深，結(jié)果為陰性。

2、產(chǎn)品組成

3、樣品收集及處理

魚(yú)、蝦等水產(chǎn)收集于干凈的容器或自封袋中；若不能及時(shí)送檢，樣本應(yīng)該去除脂肪，用剪刀剪碎或者用絞肉機(jī)攪碎后，分裝保存于-20℃下，忌反復(fù)凍融。

3.1準(zhǔn)備工作

第一次使用時(shí)，請(qǐng)把氧化劑復(fù)溶液全部倒入氧化劑瓶中，震蕩搖勻后備用，于4℃避光保存，如果長(zhǎng)時(shí)間不使用（超過(guò)一周），請(qǐng)于20℃避光保存。

3.2樣品處理

⑴取一定量的水產(chǎn)樣本（魚(yú)、蝦等）去除脂肪后，用剪刀剪碎或者用絞肉機(jī)攪碎；

⑵稱取10g已處理待測(cè)樣品于50mL離心管中。加入1瓶提取劑A和1包提取劑B，振蕩混勻5分鐘。

⑶4000轉(zhuǎn)離心5分鐘，取上清液8mL至另一個(gè)50mL離心管中，并加入1瓶萃取劑，輕輕混勻，4000轉(zhuǎn)離心3分鐘。

⑷另取1支10mL離心管中依次分別加入1滴氧化劑、步驟⑶中下層有機(jī)相5mL、1滴助溶劑，于60℃下，利用氮?dú)饣蚩諝鈱⑷軇┐蹈桑ù蹈珊髿埩艏s1滴液體）。

⑸加入1mL正己烷后震蕩混合1分鐘，移液器準(zhǔn)確加入250μL樣品復(fù)溶液，輕輕混勻。

⑹4000轉(zhuǎn)離心1分鐘（如果分層不明顯可延長(zhǎng)離心時(shí)間至5分鐘）或靜置至明顯分層，取下層液體用于檢測(cè)。

4、檢測(cè)步驟

⑴測(cè)試前將未開(kāi)封的檢測(cè)卡及待檢樣品溶液恢復(fù)至室溫。

⑵從原包裝鋁箔袋中取出檢測(cè)卡和酶標(biāo)孔，在半小時(shí)內(nèi)使用。

⑶用移液器吸取待檢樣品溶液100μL于酶標(biāo)孔中，反復(fù)吹打至孔內(nèi)紅色物質(zhì)完全溶解，等待反應(yīng)10分鐘；

⑷將檢測(cè)卡平放，吸取孔內(nèi)所有溶液滴加到加樣孔中，加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí)；

⑸反應(yīng)5～8分鐘根據(jù)示意圖判斷結(jié)果，其它時(shí)間判讀無(wú)效；

陰性結(jié)果：T線比C線深，或一樣深，表示樣品孔雀石綠濃度低于其靈敏度；

陽(yáng)性結(jié)果：T線比C線淡，表示樣品孔雀石綠濃度高于其靈敏度；

無(wú)效反應(yīng):如果測(cè)試結(jié)果C線未出現(xiàn)，表示此試劑已失效。

5、儲(chǔ)存及有效期：

原包裝在4-30℃陰涼避光干燥處儲(chǔ)存，有效期為6個(gè)月，生產(chǎn)日期及有效期見(jiàn)包裝盒。

6、注意事項(xiàng)：

⑴檢測(cè)卡在室溫下一次性使用，請(qǐng)勿重復(fù)使用。

⑵操作時(shí)請(qǐng)勿觸摸試紙顯示區(qū)，檢測(cè)時(shí)避免陽(yáng)光直射及風(fēng)扇直吹。

⑶本方法為篩查方法，若出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，建議用確證方法復(fù)查。