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9°N DNA Ligase (40 U/μL)

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詳細(xì)介紹

 

 

產(chǎn)品描述

 

9°N DNA Ligase為高溫連接酶,它能催化與同一互補(bǔ)靶DNA鏈雜交的兩條相鄰寡核苷酸鏈的5′-磷酸和3′-羥基之間形成磷酸二酯鍵。該催化反應(yīng)只有當(dāng)兩條寡核苷酸鏈與互補(bǔ)靶DNA完全配對,且兩條寡核苷酸鏈之間沒有間隙的條件下才會發(fā)生。因此可以用于檢測單堿基替換。該酶以ATP作為輔因子,在45-70區(qū)間內(nèi)均有活性。

 

產(chǎn)品組分

 

組分編號

組分名稱

產(chǎn)品編號/規(guī)格

14959ES842000 U

14959ES9210000 U

14959-A

9°N DNA Ligase (40 U/μL)

50 μL

250 μL

14959-B

10× 9°N DNA Ligase Buffer

0.5 mL

1.5 mL

 

單位定義

 

45℃條件下,孵育15 min能使50%1 μg經(jīng)BstEII消化的λDNA片段(12 bp粘性末端)發(fā)生連接所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。

 

運(yùn)輸與保存方法

 

冰袋運(yùn)輸。-20保存,有效期2。

 

注意事項(xiàng)

 

1.本產(chǎn)品可有效連接12 bp的互補(bǔ)片段,但無法連接4 bp的互補(bǔ)片段(典型限制酶消化產(chǎn)物);

2. 酶使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存;

3. 本產(chǎn)品僅做科研用途;

4. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

 

1. 反應(yīng)體系配制:

組分

用量

10× 9°N DNA Ligase Buffer

2 μL

底物:互補(bǔ)粘性末端>8 ntDNA

100 ng-1 μg

9°N DNA Ligase (40 U/μL)

1-2 μL

ddH2O

To 20 μL

2. 反應(yīng)條件:45-50連接15min。

HB220930

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