藍(lán)綠LED凝膠成像系統(tǒng)

ZG技術(shù)

簡(jiǎn)介

核酸的檢測(cè)目前仍然主要是使用溴化乙錠這類核酸染色劑及紫外光照射。然而，紫外線對(duì)核酸的降解已有很多文獻(xiàn)報(bào)道，因此可以認(rèn)為它本身就是一種核酸破壞劑。此外，紫外線對(duì)使用者來(lái)說(shuō)也具有危險(xiǎn)性。因此總的來(lái)說(shuō)，目前的這類核酸檢測(cè)技術(shù)會(huì)由于DNA分子的破壞，而導(dǎo)致如測(cè)序、克隆等多種下游應(yīng)用的效率大大降低。無(wú)害化的可見(jiàn)光已經(jīng)被用于檢測(cè)核酸，其主要局限性是只能激發(fā)綠色染料。以其開(kāi)發(fā)的全新安全核酸染料MIDORIGreen而的NIPPON Genetics EUROPE公司，針對(duì)目前的核酸檢測(cè)技術(shù)開(kāi)發(fā)了一種全新的核酸染料檢測(cè)方法，它能夠激發(fā)所有商用核酸染料。

紫外燈的危害性

DNA能夠吸收紫外光譜中的光。其結(jié)果是形成嘧啶二聚體；單鏈DNA和雙鏈DNA斷裂，DNA與DNA發(fā)生鏈間交聯(lián)和DNA與蛋白質(zhì)發(fā)生交聯(lián)。雖然生物體能夠修復(fù)這些DNA損傷并承受上述后果，但瓊脂糖凝膠中的DNA缺乏這些修復(fù)機(jī)制。此外，與整個(gè)生物體相比，凝膠中的DNA量要少得多。下面是對(duì)短期紫外線照射引起的DNA降解的研究結(jié)果：電泳后，凝膠暴露在紫外線下長(zhǎng)達(dá)60秒。PCR產(chǎn)物隨后被分離并克隆到一個(gè)對(duì)照載體中，之前用NdeI和HindIII進(jìn)行雙酶切，然后被克隆并轉(zhuǎn)染到大腸桿菌DH5α(BL21)細(xì)胞中。結(jié)果如下:

暴露在紫外線下的DNA受損嚴(yán)重，克隆效率明顯降低。60s后此外，與整個(gè)生物體相比，agel中的DNA含量要少得多。因此，我們研究了短期紫外線照射引起的DNA降解：完全破壞DNA。

第一代技術(shù)-藍(lán)色LED

2009年，引入了藍(lán)光發(fā)光二極管（LED）透射器。LED是能將電轉(zhuǎn)化為光的半導(dǎo)體。其優(yōu)點(diǎn)是有較為精確的波長(zhǎng)，效率極高，平均壽命高達(dá)50000小時(shí)。它們發(fā)射出比紫外線波長(zhǎng)更長(zhǎng)的470nm波長(zhǎng)的光。

重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)，并將DNA暴露在藍(lán)色LED燈下相同時(shí)間：

正如理論所預(yù)期的那樣，暴露后每板CFU的數(shù)量沒(méi)有任何顯著變化。因此，防止DNA損傷大大提高了克隆效率。

藍(lán)色LED的問(wèn)題

盡管使用了更為安全的光源，但使用藍(lán)色LED也有一個(gè)主要缺點(diǎn)。溴化乙錠，最常見(jiàn)的DNA染色法，在藍(lán)光激發(fā)下其結(jié)果往往比紫外要差很多。溴化乙錠與DNA結(jié)合的激發(fā)峰在480～525nm之間。如結(jié)果所示，溴化乙錠與DNA結(jié)合的信號(hào)非常微弱，幾乎無(wú)法使用。綠色DNA染料，如MIDORIGreen染料，通過(guò)藍(lán)色LED可以提供更好的信號(hào)。

技術(shù)革新

NIPPON Genetics EUROPE公司為解決這個(gè)問(wèn)題提供了檢測(cè)核酸染料的全新策略：通過(guò)創(chuàng)新性地引入波長(zhǎng)組合而不使用單一波長(zhǎng)，從而產(chǎn)生470nm至520nm的藍(lán)光/綠光光譜，這樣能夠激發(fā)470nm單一波長(zhǎng)不能激發(fā)的染料，例如溴化乙錠等。并且可以通過(guò)染料的累積能量吸收來(lái)實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。

FastGene?藍(lán)/綠LED透射臺(tái)（FG-08）產(chǎn)品正是基于這一原理發(fā)展而來(lái)：所有DNA染料的信號(hào)強(qiáng)度都有可能達(dá)到使用強(qiáng)紫外線透照儀的信號(hào)強(qiáng)度，但使用的光源卻是更安全的。溴化乙錠和更安全的替代品通過(guò)這種獨(dú)特的技術(shù)得到了一個(gè)更好的信號(hào)，并在下游應(yīng)用中取得了更好的效果，并創(chuàng)造了一個(gè)更安全的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。NIPPON Genetics EUROPE公司使用這一革命性技術(shù)而研發(fā)了獨(dú)立成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)。

“我只使用藍(lán)/綠LED成像系統(tǒng)和MIDORIGreen Direct染料，它從來(lái)就沒(méi)有讓我失望過(guò)！”

Jean Emly博士, Geneflow Ltd.公司創(chuàng)始人 , 英國(guó)

? 混合LED波長(zhǎng)可產(chǎn)生**光譜，激發(fā)多種染料。

? 無(wú)DNA/RNA降解

? 溴化乙錠產(chǎn)生更強(qiáng)的信號(hào)

? 也能激發(fā)熒光蛋白，如GFP、RFP等

成像系統(tǒng)產(chǎn)品-1　----藍(lán)/綠 LED GelPicBox

FastGene?藍(lán)/綠LED GelPicBox 將緊湊的占機(jī)身與藍(lán)/綠LED技術(shù)的優(yōu)勢(shì)結(jié)合在一起。這可能是世界上最小的成像系統(tǒng)。FastGene?藍(lán)/綠LED GelPicBox配有藍(lán)/綠和白色LED，用于記錄核酸、蛋白質(zhì)凝膠和膜。

主要特點(diǎn)

?最小的成像系統(tǒng)

?2.7” LCD顯示屏

?16 cm x 11.5 cm 觀察區(qū)域

?藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)

?USB 2.0 接口FastGene?藍(lán)/綠LED GelPicBox 將緊湊的占機(jī)身與藍(lán)/綠LED技術(shù)的優(yōu)勢(shì)結(jié)合在一起。這可能是世界上最小的成像系統(tǒng)。FastGene?藍(lán)/綠LED GelPicBox配有藍(lán)/綠和白色LED，用于記錄核酸、蛋白質(zhì)凝膠和膜。

應(yīng)用

?紅色和綠色 DNA/RNA染料的檢測(cè)

?GFP, eGFP, YFP等熒光蛋白的檢測(cè)

?蛋白質(zhì)凝膠記錄

?培養(yǎng)皿和膜記錄

?瓊脂糖凝膠中DNA的切取

圖像格式

?Jpeg

?TIFF

?BMP

照明

---藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)獨(dú)有的激發(fā)技術(shù)

?能夠檢測(cè)紅色和綠色 DNA染料

?成像面積 16 cm x 11 cm

?超均勻透射

?每側(cè)12個(gè)LED陣列

---白色LED

?蛋白檢測(cè)

?白色LED置于蓋上

---白色LED暗室燈

?膜和培養(yǎng)培養(yǎng)皿記錄

?兩個(gè)白色LED陣列照亮成像箱

選配

---CMOS傳感器

?固定焦距

?9 M像素

?圖像可以以TIFF、JPEG和BMP格式記錄

?外接U盤(pán)

成像系統(tǒng)產(chǎn)品-2　----FAS-Digi

FastGene? FAS Digi是第一個(gè)采用藍(lán)/綠LED成像技術(shù)的成像系統(tǒng)，并采用了模塊化系統(tǒng)設(shè)計(jì)。它由FastGene? 藍(lán)/綠 LED 透射臺(tái)(FG-08) 和高端相機(jī)組成，擁有我們所有成像系統(tǒng)中最高的分辨率和令人難以置信的16M像素。攝像頭支持Wi-Fi，可以使用智能設(shè)備進(jìn)行控制。

主要特點(diǎn)

?超高分辨率 - 16 MPixel LiveMOS 傳感器

?3” 可翻轉(zhuǎn)觸摸屏

?20 cm x 16 cm 藍(lán)色/綠色 LED 透射臺(tái)

?兼容白色LED透射臺(tái)

?可由智能手機(jī)和平板電腦控制

應(yīng)用

?紅色和綠色 DNA/RNA染料的檢測(cè)

?GFP, eGFP, YFP等熒光蛋白的檢測(cè)

?蛋白質(zhì)凝膠記錄

?培養(yǎng)皿和膜記錄

?瓊脂糖凝膠中DNA的切取

圖像格式

?Jpeg

?RAW

照明

---藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)獨(dú)有的激發(fā)技術(shù)

?能夠檢測(cè)紅色和綠色的DNA染料

?成像面積20 cm x 16 cm

?超均勻透射

?每側(cè)均有6個(gè)大型LED陣列

選配

---LiveMOS傳感器

?24 mm - 64 mm 焦距(256 mm 數(shù)碼變焦)

?16 MPixel

?觸摸屏對(duì)焦

?圖像可以用JPEG和RAW格式記錄

成像系統(tǒng)產(chǎn)品-3　----FAS-V

FastGene?FAS-V是我們zuixianjin的成像系統(tǒng)。它是一個(gè)獨(dú)立的成像系統(tǒng)，內(nèi)置一臺(tái)電腦和一個(gè)10.4英寸的觸摸屏。它包含了我們迄今為止最大的成像區(qū)域，用于DNA和蛋白質(zhì)成像。它可選超靈敏的CCD傳感器與高端的齊焦透鏡，這種相結(jié)合的方式通常只有在高端的顯微鏡中才能看到。我們?cè)谶@個(gè)易于使用的系統(tǒng)中將獨(dú)特的激發(fā)技術(shù)與高端部件相結(jié)合以提供**檢測(cè)結(jié)果。

主要特點(diǎn)

?超靈敏2MPixel CCD相機(jī) (0.13 Lux)

?10.4” 觸摸屏

?26 cm x 21 cm 藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)

?26 cm x 21 cm 白色LED 透射臺(tái)

應(yīng)用

?DNA/RNA 染料的檢測(cè)和記錄

?GFP, eGFP, YFP等熒光蛋白的檢測(cè)

?蛋白質(zhì)凝膠記錄

?培養(yǎng)皿和膜記錄

?第三方圖像編輯

圖像格式

?Jpeg

?TIFF

?BMP

?PNG

照明

---藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)獨(dú)有的激發(fā)技術(shù)

?能檢測(cè)紅色和綠色DNA染料

?超大的26 cm x 21 cm 成像區(qū)域

?超均勻透射

?每側(cè)12個(gè)大型LED陣列

---白色LED透射臺(tái)

?蛋白檢測(cè)

?超大LED白光板 (26 cm x 21 cm)

?觸摸屏直接控制

---白色LED暗室燈

?膜及培養(yǎng)皿記錄

?兩個(gè)白色LED陣列照亮成像箱

選配

---CCD傳感器

?CCD傳感器尺寸1/1.8“

?像素尺寸4.4 μm

?極弱信號(hào)（0.13 Lux*）檢測(cè)

?圖像可以以 TIFF, JPEG, BMP 和PNG格式保存

?16 GB內(nèi)部固態(tài)硬盤(pán)存儲(chǔ)或外部USB存儲(chǔ)

?曝光時(shí)間0.001秒至30秒

?日本制造

*正常一天的清晰度在20000到100000Lux之間

---超亮齊焦鏡頭- 無(wú)需對(duì)焦

FastGene?FAS-V的鏡頭為齊焦鏡頭（放大或縮小時(shí)不必重新調(diào)整預(yù)先設(shè)置的焦距）

?f/1.2大孔徑

?無(wú)級(jí)調(diào)節(jié)光圈

?6倍變焦

?焦距12.5 mm 至75 mm

*鏡頭光圈打開(kāi)